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發(fā)布時(shí)間：2023-05-23 07:33:25 稿源：創(chuàng)意嶺閱讀： 136

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去甲萬古霉素的鹽酸鹽制品

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1.由MRSA/MRSE引起的感染：如敗血癥、呼吸系統(tǒng)感染、皮膚軟組織感染、腹腔膽系感染、泌尿系統(tǒng)感染、心內(nèi)膜炎、骨髓炎、腦膜炎、骨關(guān)節(jié)感染等。2.對(duì)青霉素或頭孢菌素類過敏病人的革蘭氏陽性菌感染。
3.具有MRSA/MRSE感染危險(xiǎn)因素而其他抗生素治療無效的感染，特別是重癥感染。4.口服治療由難辨梭狀芽孢桿菌引起的偽膜性結(jié)腸炎。菌株20株MRSA均為1997年1～6月從北京醫(yī)院臨床血液標(biāo)本分離而來，并經(jīng)VITEK-AMS操作程序用GPT鑒定卡上機(jī)鑒定。MRSA菌株判定按照NCCLS規(guī)定的微量肉湯稀釋法進(jìn)行，在MNB中加入2%氯化鈉，抗生素使用苯唑西林，接種菌濃度為5×105CFU/ml，35℃孵育24h后觀察MIC>4mg/L。標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌為金葡菌ATCC25923。
抗菌藥物VNC為美國Lilly公司產(chǎn)品，批號(hào)X-950561；NVNC批號(hào)96702。耐藥變異株的誘導(dǎo)據(jù)VNC、NVNC分別對(duì)各菌株的MIC，將上述兩種藥物分別配制成4倍MIC濃度于4ml營養(yǎng)肉湯的試管中，接種細(xì)菌約107CFU，置于37℃下恒溫孵育4h，轉(zhuǎn)種無菌物血瓊脂平板上恒溫37℃孵育20h。經(jīng)在含抗菌藥和不含抗菌藥培養(yǎng)基中連續(xù)20次（代）轉(zhuǎn)代培養(yǎng)，每間隔5次（代）鑒定菌種及鑒定菌種及檢測(cè)VNC、NVNC對(duì)各菌的MIC。若藥物誘導(dǎo)后MIC>4倍誘導(dǎo)前MIC則定為耐藥。
誘導(dǎo)菌株的生長性狀、時(shí)間和頻率分別取未經(jīng)抗菌藥和經(jīng)4倍VNC或NVNCMIC濃度第5次、第10次、第15次、第20次孵育培養(yǎng)菌的0.1/ml標(biāo)本，種植在無藥物血瓊脂平板上恒溫37℃孵育、於18h、36h、54h觀察其菌落生長性狀；分別取未經(jīng)抗菌藥和經(jīng)4倍VNC或NVNCMIC濃度第5次、第10次、第15次、第20次孵育培養(yǎng)菌的0.1/ml標(biāo)本，用10倍生理鹽水系列稀釋。以每種稀釋液的0.1/ml分別種植在不含有抗菌藥物的MH瓊脂培養(yǎng)基平皿上，置于37℃恒溫孵育，分別於18h、36h、54h做菌落相互計(jì)數(shù)比較。 3.1經(jīng)VNC誘導(dǎo)20株MRSA，有16株對(duì)VNC的MIC(1～8mg/L平均5.62mg/L)較誘導(dǎo)前MIC(1～8mg/L平均1.75mg/L)普遍提高，但提高幅度只在2倍之內(nèi)；另4株VNC的MIC與誘導(dǎo)前相同；經(jīng)NVNC誘導(dǎo)，有14株對(duì)NVNC的MIC(1～8mg/L，平均6.1mg/L)較誘導(dǎo)前（0.5～4mg/L，平均1.5mg/L)普遍提高，但提高幅度只在3倍之內(nèi)；另6株NVNC的MIC與誘導(dǎo)前相同（見表1)。VNCNVNC分別對(duì)誘導(dǎo)前20株MRSA的MIC平均值分別為2.05mg/L、1.82mg/L；二者間無顯著差異（t=0.409，P<0.05)。VNC、NVNC分別對(duì)VNC、NVNC誘導(dǎo)后20株MRSA的MIC平均值分別為5.15mg/L、5.05mg/L；二者間無顯著差異（t=0.4，P>0.05)。
10株MRSA經(jīng)VNC誘導(dǎo)不同次（代）菌株生長的時(shí)間-頻率；經(jīng)VNC誘導(dǎo)5代、10代菌株轉(zhuǎn)種普通血平板上培養(yǎng)36h，菌落細(xì)?。ㄖ睆?lt;2mm)，菌落周圍溶血現(xiàn)象減弱；培養(yǎng)54h，菌落生長形態(tài)正常；轉(zhuǎn)種無抗菌藥MH瓊脂培養(yǎng)皿上孵化18h、36h、54h平均生長頻率分別為10－49、10－4、10－1；10－4.2、10－3.8、10－0.7。經(jīng)VNC誘導(dǎo)15代、20代菌株在血平板上培養(yǎng)18h，菌落生長性狀良好；在無抗菌藥MH瓊脂培養(yǎng)皿上孵化18h、36h、54h平均生長頻率分別為10－0.9、10－0.7、10－0.4；10－0.7、10-0.7、10－0.5、10－0.2。經(jīng)NVNC誘導(dǎo)5代、10代、15代、20代菌株分別在血平板、無抗菌藥MH瓊脂培養(yǎng)皿上培養(yǎng)18h、36h、54h，菌落生長性狀、時(shí)間和頻率變化均同VNC相同。引起醫(yī)院感染的能力及致病性很強(qiáng)的MRSA，在臨床標(biāo)本檢出率迅速增高，不少大醫(yī)院MRSA檢出率約占分離葡萄球菌的80%。MRSA感染危險(xiǎn)性和治療困難性越來越大，人們對(duì)治療MRSA感染有效的糖肽類抗菌藥VCN、NVCN寄于重望。故有關(guān)MRSA對(duì)VCN耐藥問題研究倍受人們重視。本研究結(jié)果表明VNC對(duì)經(jīng)VNC殺菌濃度（4倍MIC)存活期內(nèi)誘導(dǎo)培養(yǎng)20次MRSA的MIC僅較誘導(dǎo)前提高兩倍，未能誘導(dǎo)耐VNCMRSA變異株產(chǎn)生。這與美國學(xué)者ChatrchaiWatanakvnalvrn采用VNC次抑菌濃度（1/2MIC)連續(xù)傳代誘導(dǎo)MRSE25次，未能誘導(dǎo)產(chǎn)生耐VNCMRSE的研究結(jié)果相同，均證實(shí)體外誘導(dǎo)耐甲氧西林葡萄球菌對(duì)VCN產(chǎn)生耐藥相當(dāng)困難。該結(jié)果與VNC被應(yīng)用于臨床近40年，其耐藥性未見增加，仍是目前治療各種嚴(yán)重革蘭氏陽性菌感染，特別是對(duì)其他抗菌藥耐藥或療效差的MRSA、MRSE及腸球菌屬所致感染效果可靠這一臨床事實(shí)相一致。細(xì)菌在體外或體內(nèi)均不易產(chǎn)生對(duì)VNC耐藥性可能與VNC除了作用于細(xì)菌細(xì)胞壁與粘肽的側(cè)鏈形成復(fù)合物，從而抑制細(xì)胞壁的蛋白合成外，還改變細(xì)胞膜通透性及選擇性抑制RNA合成等多種作用機(jī)理有關(guān)。
結(jié)果顯示國產(chǎn)NVNC對(duì)經(jīng)NVNC殺菌濃度（4倍MIC)存活期內(nèi)誘導(dǎo)20次MRSA的MIC僅較誘導(dǎo)前提高3倍，未能誘導(dǎo)耐NVNCMRSA變異株產(chǎn)生；經(jīng)NVNC誘導(dǎo)前、后的MIC平均值分別同VNC誘導(dǎo)前、后的MIC平均值無明顯差異（P>0.05)；證明NVNC體外抗菌活性同NVC相似，在體外也同樣不易誘導(dǎo)耐藥性產(chǎn)生。提示臨床使用國產(chǎn)NVNC治療MRSA感染癥的可靠性和穩(wěn)定性。本研究發(fā)現(xiàn)，MRSA經(jīng)4倍VNCMIC或4倍NVNCMIC誘導(dǎo)5代、10代轉(zhuǎn)種血平板或MH瓊脂培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在36h內(nèi)菌落生長，畸形改變，菌株出現(xiàn)頻率低（約平均10－4.2)，但經(jīng)VNC或NVNC誘導(dǎo)至15代、20代，18小時(shí)內(nèi)菌落生長形態(tài)正常，菌株出現(xiàn)頻率高（約平均10－0.8)；表明MRSA經(jīng)VNC或NVNC短期殺菌濃度反復(fù)接觸后，VNC或NVNC的后效作用將消失；說明盡管MRSA經(jīng)VNC或NVNC體外誘導(dǎo)耐藥性難以產(chǎn)生，但能產(chǎn)生一定的耐受性改變；隨著誘導(dǎo)時(shí)間延長、VNC或NVNC誘導(dǎo)耐藥可能性是存在的。提示隨著VNC臨床實(shí)用價(jià)值增高，其臨床應(yīng)用范圍擴(kuò)大，應(yīng)用次數(shù)增多，VNC或NVNC誘導(dǎo)耐藥性出現(xiàn)可能性及加快耐藥出現(xiàn)的趨勢(shì)越來越大。因此，臨床應(yīng)盡量減少VNC應(yīng)用，如可能情況下，應(yīng)口服甲硝唑或替硝唑而不是VNC治療與抗生素相關(guān)性結(jié)腸炎；VNC僅限于對(duì)其他抗菌藥耐藥或療效差的MRSA、MRSE及腸球菌屬所致感染，同時(shí)應(yīng)對(duì)耐VNC菌株進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)控，以防止和延緩耐VNCMRSA的出現(xiàn)和播散極為重要。

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